反向pcr之所以能扩增未知序列的原因在于（反向pcr扩增质粒）

哈喽,大家好~~~我是小编田甜，关于反向pcr之所以能扩增未知序列的原因在于，反向pcr扩增质粒这个很多人还不知道,那么现在让田甜带着大家一起来看看吧！

1、设计一对引物，针对基因两端（覆盖酶切位点），在上游引物中酶切位点后的一段序列中添加一个碱基，扩增以后，酶切产物和空载体，再连接一遍，转化，小提拿去测序。

2、最好上游换另一个内切酶位点，这样方便双酶切检测，区别于原来的质粒。

本文分享完毕，希望对大家有所帮助哦。