双缩脲试剂的配制方法以及注意事项(双缩脲试剂怎么配)
哈喽,大家好~~~我是小编田甜,关于双缩脲试剂的配制方法以及注意事项,双缩脲试剂怎么配这个很多人还不知道,那么现在让田甜带着大家一起来看看吧!
1、碱性条件下,双缩脲h2n-co-nh-co-nh2可以和cu离子作用生成紫色沉淀。
2、灵敏度差,测定范围窄,样品需要量大,不同的蛋白质产生颜色的深浅相近,因此它常用于需要快速,但并不需要十分精确的蛋白质测定。
3、 干扰测定的物质包括有:在性质上是氨基酸或肽的缓冲液,如TrIs缓冲液,因为它们产生阳性呈色反应,铜离子也容易被还原,有时出现红色沉淀。
4、配制:双缩脲试剂A是质量分数为0.1 g/mL的NaOH水溶液;双缩脲试剂B是质量分数为0.01 g/mL的CuSO4水溶液。
5、先在待测液中加入双缩脲试剂A 3mL,振荡均匀(营造碱性环境),再加入1~2滴双缩脲试剂B,振荡均匀。
6、如果待测液里含有蛋白质,那么会看到溶液变成紫色。
7、具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。
8、蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫色的络合物。
9、颜色深浅与蛋白质浓度成正比。
10、以上内容参考:百度百科-双缩脲试剂。
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